Mbinu za utafiti hadubini ni mbinu za kusoma vitu mbalimbali kwa kutumia vifaa maalum. Inatuwezesha kuzingatia muundo wa vitu na viumbe, ukubwa wa ambayo ni zaidi ya azimio la jicho la mwanadamu. Katika makala haya, tutachambua kwa ufupi mbinu za utafiti wa hadubini.
Maelezo ya jumla
Njia za kisasa za uchunguzi wa hadubini hutumiwa katika mazoezi yao na wataalam tofauti. Miongoni mwao ni virologists, cytologists, hematologists, morphologists na wengine. Njia kuu za uchunguzi wa microscopic zimejulikana kwa muda mrefu. Kwanza kabisa, hii ni njia nyepesi ya kutazama vitu. Katika miaka ya hivi karibuni, teknolojia nyingine zimeanzishwa kikamilifu katika mazoezi. Kwa hivyo, tofauti ya awamu, luminescent, kuingiliwa, polarization, infrared, ultraviolet, mbinu za stereoscopic za utafiti zimepata umaarufu. Wote ni msingi wa mali mbalimbali. Sveta. Kwa kuongeza, mbinu za utafiti wa microscopic ya elektroni hutumiwa sana. Njia hizi zinakuwezesha kuonyesha vitu kwa kutumia mkondo ulioelekezwa wa chembe za kushtakiwa. Ikumbukwe kwamba mbinu hizo za utafiti hazitumiwi tu katika biolojia na dawa. Njia ya microscopic ya kusoma metali na aloi katika tasnia ni maarufu sana. Utafiti kama huo unawezesha kutathmini tabia ya viungo, kuendeleza teknolojia ili kupunguza uwezekano wa kushindwa na kuongeza nguvu.
Njia nyepesi: sifa
Njia hizo ndogo sana za kusoma vijidudu na vitu vingine zinatokana na uthabiti tofauti wa kifaa. Mambo muhimu katika kesi hii ni mwelekeo wa boriti, vipengele vya kitu yenyewe. Mwisho, hasa, unaweza kuwa wa uwazi au opaque. Kwa mujibu wa mali ya kitu, mali ya kimwili ya mabadiliko ya flux mwanga - mwangaza na rangi, kutokana na amplitude na wavelength, ndege, awamu na mwelekeo wa uenezi wa wimbi. Mbinu mbalimbali za utafiti wa hadubini zinatokana na matumizi ya sifa hizi.
Maalum
Ili kusoma kwa mbinu nyepesi, kwa kawaida vitu hupakwa rangi. Hii inakuwezesha kutambua na kuelezea baadhi ya mali zao. Hii inahitaji kwamba tishu zirekebishwe, kwani uchafu utafunua miundo fulani tu katika seli zilizouawa. Katika seli hai, rangi hutengwa kama vacuole kwenye cytoplasm. Haina rangi miundo. Lakini kwa msaada wa darubini ya mwanga, vitu vilivyo hai vinaweza pia kuchunguzwa. Kwa hili, njia muhimu ya utafiti hutumiwa. Katika hali hiyo, condenser ya giza-shamba hutumiwa. Imeundwa kwa hadubini nyepesi.
Kusoma vitu ambavyo havijapakwa rangi
Hutekelezwa kwa kutumia hadubini ya utofautishaji wa awamu. Njia hii inategemea diffraction ya boriti kwa mujibu wa vipengele vya kitu. Katika mchakato wa mfiduo, mabadiliko katika awamu na urefu wa wimbi huzingatiwa. Kuna sahani inayopitisha mwanga katika lengo la hadubini. Kuishi au kudumu, lakini sio vitu vya rangi, kwa sababu ya uwazi wao, karibu usibadilishe rangi na amplitude ya boriti inayopita ndani yao, na kusababisha mabadiliko tu katika awamu ya wimbi. Lakini wakati huo huo, baada ya kupita kwenye kitu, flux ya mwanga inatoka kwenye sahani. Matokeo yake, kati ya mionzi iliyopitia kitu na kuingia kwenye historia ya mwanga, tofauti ya urefu wa wimbi inaonekana. Kwa thamani fulani, athari ya kuona hutokea - kitu cha giza kitaonekana wazi dhidi ya historia ya mwanga, au kinyume chake (kwa mujibu wa vipengele vya sahani ya awamu). Ili kuipata, lazima tofauti iwe angalau 1/4 ya urefu wa wimbi.
Njia isiyo ya kawaida
Ni aina ya mbinu ya utofautishaji wa awamu. Njia ya anoptral inahusisha matumizi ya lens yenye sahani maalum zinazobadilisha rangi tu na mwangaza wa mwanga wa nyuma. Hii inapanua kwa kiasi kikubwa uwezekano wa kusoma vitu hai visivyo na rangi. Njia ya utafiti wa utofauti wa awamu hutumika katika biolojia, parasitology katika utafiti wa seli za mimea na wanyama,viumbe rahisi zaidi. Katika hematolojia, njia hii hutumika kukokotoa na kuamua upambanuzi wa vipengele vya damu na uboho.
Mbinu za kuingilia
Mbinu hizi za utafiti hadubini kwa ujumla hutatua matatizo sawa na yale ya utofautishaji wa awamu. Hata hivyo, katika kesi ya mwisho, wataalam wanaweza tu kuchunguza mtaro wa vitu. Njia za utafiti wa microscopic za kuingiliwa hukuruhusu kusoma sehemu zao, kufanya tathmini ya kiasi cha vitu. Hii inawezekana kutokana na bifurcation ya mwanga wa mwanga. Mtiririko mmoja hupitia chembe ya kitu, na mwingine hupita. Katika kijicho cha darubini, huungana na kuingilia kati. Tofauti ya awamu inayotokana inaweza kuamua na wingi wa miundo tofauti ya seli. Kwa kupima kwa mfululizo kwa fahirisi za refractive, inawezekana kuamua unene wa tishu zisizo za kudumu na vitu vilivyo hai, maudhui ya protini ndani yao, mkusanyiko wa dutu kavu na maji, nk Kwa mujibu wa data zilizopatikana, wataalamu wana uwezo wa kutathmini isivyo moja kwa moja upenyezaji wa utando, shughuli ya kimeng'enya, na kimetaboliki ya seli.
Polarization
Hutekelezwa kwa kutumia Nicol prism au filamu za polaroid. Wao huwekwa kati ya madawa ya kulevya na chanzo cha mwanga. Mbinu ya utafiti wa microscopic ya polarization katika microbiolojia inafanya uwezekano wa kusoma vitu vilivyo na sifa zisizo sawa. Katika miundo ya isotropiki, kasi ya uenezi wa mwanga haitegemei ndege iliyochaguliwa. Katika kesi hiyo, katika mifumo ya anisotropic, kasi inabadilika kwa mujibu wauelekezi wa mwanga kando ya mhimili unaovuka au wa longitudinal wa kitu. Ikiwa ukubwa wa kinzani kando ya muundo ni mkubwa zaidi kuliko ule unaovuka, kinzani mara mbili chanya huundwa. Hii ni tabia ya vitu vingi vya kibiolojia ambavyo vina mwelekeo mkali wa Masi. Wote ni anisotropic. Aina hii, haswa, inajumuisha myofibrils, neurofibrils, cilia katika epithelium iliyotiwa, nyuzi za collagen na zingine.
Thamani ya uainishaji
Ulinganisho wa asili ya mwonekano wa mwale na faharasa ya anisotropi ya kitu huwezesha kutathmini mpangilio wa molekuli ya muundo. Njia ya polarization hufanya kama mojawapo ya mbinu za histological za uchambuzi, hutumiwa katika cytology, nk Sio tu vitu vya rangi vinaweza kujifunza kwa mwanga. Mbinu ya utengano hufanya iwezekane kusoma matayarisho yasiyo na doa na yasiyorekebishwa - asili - matayarisho ya sehemu za tishu.
Njia za luminescent
Zinatokana na sifa za baadhi ya vitu ili kutoa mwanga katika sehemu ya samawati-violet ya wigo au katika miale ya UV. Dutu nyingi, kama vile protini, vitamini vingine, coenzymes, madawa ya kulevya, hupewa luminescence ya msingi (ya ndani). Vitu vingine huanza kuangaza wakati fluorochromes, rangi maalum, zinaongezwa. Viungio hivi kwa kuchagua au kusambaa kwa miundo ya seli ya mtu binafsi au misombo ya kemikali. Mali hii iliunda msingi wa matumizi ya microscopy ya luminescence kwa histochemical namasomo ya saitolojia.
Maeneo ya matumizi
Kwa kutumia immuno-fluorescence, wataalam hugundua antijeni za virusi na kubaini ukolezi wao, kutambua virusi, kingamwili na antijeni, homoni, bidhaa mbalimbali za kimetaboliki, na kadhalika. Katika suala hili, katika uchunguzi wa herpes, mumps, hepatitis ya virusi, mafua na maambukizi mengine, njia za luminescent za kuchunguza vifaa hutumiwa. Njia ya microscopic immunofluorescence inafanya uwezekano wa kutambua tumors mbaya, kuamua maeneo ya ischemic katika moyo katika hatua za mwanzo za mashambulizi ya moyo, nk.
Kutumia mwanga wa urujuanimno
Inatokana na uwezo wa idadi ya dutu iliyojumuishwa katika seli hai, viumbe vidogo au tishu zisizobadilika, lakini zisizo na rangi, zinazoonekana-mwanga-wazi kunyonya miale ya UV ya urefu fulani wa mawimbi. Hii ni ya kawaida, hasa, kwa misombo ya macromolecular. Hizi ni pamoja na protini, asidi ya kunukia (methylalanine, tryptophan, tyrosine, nk), asidi ya nucleic, besi za pyramidal na purine, na kadhalika. Microscopy ya ultraviolet inafanya uwezekano wa kufafanua ujanibishaji na kiasi cha misombo hii. Wakati wa kusoma kuhusu vitu vilivyo hai, wataalamu wanaweza kuona mabadiliko katika michakato yao ya maisha.
Ziada
Madarubini ya infrared hutumika kuchunguza vitu ambavyo havina mwangaza na miale ya UV kwa kunyonya.miundo ya mtiririko, urefu wa wimbi ambalo ni 750-1200 nm. Ili kutumia njia hii, hakuna haja ya kufichua maandalizi ya matibabu ya kemikali hapo awali. Kama sheria, njia ya infrared hutumiwa katika anthropolojia, zoolojia na nyanja zingine za kibaolojia. Kuhusu dawa, njia hii hutumiwa hasa katika ophthalmology na neuromorphology. Utafiti wa vitu vya volumetric unafanywa kwa kutumia microscopy ya stereoscopic. Muundo wa vifaa hukuruhusu kufanya uchunguzi kwa macho ya kushoto na kulia kwa pembe tofauti. Vitu vya opaque vinachunguzwa kwa ukuzaji wa chini (si zaidi ya mara 120). Mbinu za stereoscopic hutumiwa katika upasuaji mdogo, pathomorphology, na matibabu ya uchunguzi.
Mikroscopi ya elektroni
Hutumika kusoma muundo wa seli na tishu katika viwango vya molekuli na seli ndogo. Microscopy ya elektroni imefanya iwezekanavyo kufanya kiwango kikubwa cha ubora katika uwanja wa utafiti. Njia hii hutumiwa sana katika biochemistry, oncology, virology, morphology, immunology, genetics na viwanda vingine. Ongezeko kubwa la azimio la vifaa hutolewa na mtiririko wa elektroni ambazo hupita kwenye utupu kupitia mashamba ya umeme. Mwisho, kwa upande wake, huundwa na lenses maalum. Elektroni zina uwezo wa kupita katika miundo ya kitu au kuonyeshwa kutoka kwao kwa kupotoka kwa pembe tofauti. Matokeo yake, onyesho linaundwa kwenye skrini ya luminescent ya chombo. Kwa microscopy ya upitishaji, picha iliyopangwa hupatikana, na skanning, kwa mtiririko huo, ya volumetric.
Masharti ya lazima
Inafaa kukumbuka kuwa kabla ya kufanyiwa uchunguzi wa hadubini ya elektroni, kifaa hufanyiwa maandalizi maalum. Hasa, fixation ya kimwili au kemikali ya tishu na viumbe hutumiwa. Nyenzo za sehemu na biopsy, kwa kuongeza, zimepungukiwa na maji, zimewekwa kwenye resini za epoxy, zilizokatwa na visu za almasi au kioo kwenye sehemu za ultrathin. Kisha wanatofautishwa na kujifunza. Katika darubini ya skanning, nyuso za vitu zinachunguzwa. Ili kufanya hivyo, hunyunyizwa na dutu maalum kwenye chumba cha utupu.
