Aina ya maambukizo ya bakteria yanahitaji utambuzi wazi wa pathojeni na ufafanuzi wa spishi zake. Kuamua aina ya microorganism, microbiologists husaidiwa na tabia yake ya tinctorial - unyeti wa microbe kwa uchafu na dyes mbalimbali. Njia hii inakuwezesha kuchunguza morphology ya pathogen. Sifa za kubadilikabadilika kwa bakteria ni za umuhimu mkubwa kwa utafiti wa vitendo na wa kinadharia katika uwanja wa biolojia.
Utafiti mdogo
Katika bakteriolojia, kuna mbinu nyingi za kutia madoa vijiumbe. Yote inategemea tabia ya tinctorial ya bakteria. Madoa hukuruhusu kuamua sura yao, muundo, saizi, msimamo wa jamaa. Hii inaruhusu kutatua matatizo ya kupanga aina za viumbe vidogo vya biolojia ya jumla na biolojia linganishi.
Kwa nini zipakwe
Bakteria ni kivitendoviumbe vya uwazi, na bila matumizi ya uchafuzi, hazionekani vizuri kwa microscopy ya kawaida. Unaweza kutumia aina maalum za hadubini (utofautishaji wa awamu, uwanja mweusi) kusoma vitu, lakini njia rahisi ni kuweka madoa, baada ya hapo bakteria huonekana kwa hadubini ya kawaida ya mwanga.
Maandalizi ya mfano
Bila kujali mbinu ya upakaji madoa inayotumika, kuna kanuni sawa za kuandaa kitu kinachochunguzwa. Hatua zifuatazo ni za lazima:
- Vyombo tasa hufanya kupaka kwenye slaidi ya glasi.
- Sampuli inakaushwa. Hii inafanywa kwa joto la kawaida au kwa kutumia makabati ya kukaushia.
- Ikifuatiwa na hatua ya urekebishaji - vijidudu huunganishwa kwenye glasi kwa misombo maalum.
- Madoa ifaayo - sampuli hufunikwa kwa rangi kwa muda maalum, kisha huoshwa.
- Kukausha mwisho - sampuli imekaushwa tena.
Rangi zinazojulikana zaidi
Rangi zinazotumika sana zinatokana na anilini yenye thamani tofauti za asidi (pH). Rangi nyingi ni poda ambazo hutiwa katika pombe.
Rangi ambamo chembechembe za kupaka rangi huitwa msingi (pH zaidi ya 7). Zinaweza kutumika kutia doa vijiumbe katika rangi nyekundu (magenta, safranin), zambarau (methyl violet, thionine), bluu (methylene bluu), kijani (malachite kijani), kahawia (chrysoidin) na nyeusi (indulin).
Dyes, ambamo viambajengo vya rangi ni anions, huitwa tindikali (pH chini ya 7). Zitatia doa sampuli nyekundu (eosin), njano (picrin), au nyeusi (nigrosin).
Kuna kundi la rangi zisizoegemea upande wowote (kwa mfano, rhodamine B), ambapo cations na anions hutumika kama vijenzi vya kupaka rangi.
Utamaduni umekufa au hai
Mbinu za uwekaji madoa zimegawanywa katika vikundi viwili kulingana na aina ya maisha ya sampuli ya jaribio.
- Madoa Muhimu (ya maisha). Njia hii ya kujifunza mali ya microorganisms hutumiwa katika utafiti wa tishu zilizo hai, ambayo inafanya uwezekano wa kuchunguza taratibu muhimu za microbes. Kwa upakaji huu wa rangi, rangi zenye sumu ya chini na nguvu ya juu ya kupenya hutumiwa.
- Madoa baada ya umuhimu. Huu ni uchafuzi wa vijidudu vilivyokufa au vilivyouawa. Shukrani kwa mali ya tinctorial ya bakteria, microbiologists huamua muundo wao. Upakaji madoa huu ndio unaotumika sana.
Gram-chanya na Gram-negative
Ni sifa hizi za bakteria zinazopatikana kwenye maelekezo ya dawa mbalimbali. Njia hii ya kusoma mali ya tinctorial ya bakteria inategemea matumizi ya rangi ya gentian violet na fixation ya iodini. Hii ni mbinu ya Hans Christian Gram, daktari wa Denmark ambaye aliipendekeza mwaka wa 1884. Kama matokeo ya uchafu huu, bakteria wamegawanywa katika vikundi viwili:
- Gramu (+) - geuza buluu(staphylococci na streptococci).
- Gramu (-) - rangi ya waridi yenye madoa hadi nyekundu (enterobacteria, salmonella, E. coli).
Matokeo tofauti ya madoa yanatokana na sifa tofauti za utiririshaji wa kuta za bakteria. Mbinu ya Gram stain bado ndiyo njia kuu katika utambuzi wa baadhi ya magonjwa ya kuambukiza.
mbinu nyingine za upakaji madoa
Hebu tuangazie mbinu chache zaidi zinazotumiwa sana katika bakteriolojia.
- Njia ya Ziehl-Nelson - huamua upinzani wa asidi ya bakteria. Inabainisha visababishi vya ugonjwa wa kifua kikuu na mycobacteriosis.
- mbinu ya Romanovsky-Giemsa - hutia doa acidofili (asidi ya asetiki na asidi ya lactic) bakteria nyekundu, na basophilic (spirochetes na protozoa) bluu.
- mbinu ya Morozov - hutia bakteria rangi ya kahawia na kufanya flagella yao ionekane.
Spores zinaweza kuonekana
Madoa ya fuchcin ya Tsiel hukuruhusu kuona spora za bakteria. Kuwa na rangi ya pink baada ya kuchafua, zinaonekana wazi dhidi ya asili ya bakteria ya bluu. Njia hii pia ni zana ya bakteriolojia na ina umuhimu mkubwa wa kiutendaji.
