Katika ubainishaji tofauti wa enterobacteria na baadhi ya vibrio, mmenyuko wa Voges-Proskauer huchukua nafasi maalum. Kipimo hiki kinatokana na uwezo wa bakteria kuchachusha glukosi na kutengeneza asetoini.
Kiini cha mchakato wa utafiti
Katika biolojia, mmenyuko wa Voges-Proskauer mara nyingi hutumiwa kutofautisha kati ya familia ya Yersinia ya enterobacteria (pamoja na vimelea vya ugonjwa wa pseudotuberculosis na enterocolitis), Escherichia coli, na aerobes zinazounda spore. Matokeo yake yanaonyeshwa kwa kupaka rangi kati vitendanishi fulani vinapoongezwa.
Jaribio hili ni la mfululizo wa IMVC (kifupi cha Indol, Methyl Red, Voges-Proskauer i Citrate) - kundi la majaribio ya vitambulisho ikijumuisha ufafanuzi tofauti:
- yenye indole, kulingana na mgawanyiko wa tryptophan kuwa indole, inayotumika pamoja na kitendanishi cha Kovacs au Ehrlich;
- kutumiamethylroth, au nyekundu ya methyl, ambayo hutambua pH fulani kutokana na umetaboli wa glukosi;
- Matendo ya Voges-Proskauer kwa utambuzi wa acetyl-methylcarbinol;
- matumizi ya sitrati yenye mabadiliko ya rangi kutokana na uwekaji wa kati.
Kiini cha mchakato huo ni taswira ya uwepo wa bakteria waliogunduliwa kutokana na mwingiliano wa asetoini inayoundwa nao na caustic potash katika uwepo wa oksijeni. Acetyl-methylcarbinol ni oxidized kwa diacetyl, ambayo huunda kiwanja cha rangi nyekundu au nyekundu. Ongeza usikivu wa jaribio kwa kuanzisha alpha-naphthol kabla ya kuongeza potashi ya caustic.
Mipangilio ya majaribio
Uundaji wa mmenyuko wa Voges-Proskauer unahusisha upanzi wa awali wa vijidudu. Utamaduni safi hupandwa kwenye njia ya uchunguzi wa tofauti ya Clark, tofauti ambayo ni mchuzi wa Clark (bila ya kuongeza agar-agar). Njia iliyotengenezwa tayari hutumiwa, au imeandaliwa kwa kujitegemea. Viungo ni pamoja na:
- 5g peptoni;
- 5g glucose;
- 5g dibasic potassium phosphate;
- 1L distillate.
Wakati wa utafiti, utamaduni huchanjwa kwa kitanzi tasa cha bakteria hadi kwenye chombo kioevu. Kiasi - 5 ml katika tube ya mtihani pamoja na udhibiti. Incubation hufanyika kwa joto la digrii 35-37 kwa siku mbili. Kisha, utafiti wa mmenyuko wa Voges-Proskauer unafanywa kwa hatua:
- 2, 5 ml ya utamaduni wa mchuzi huhamishiwa kwenye bomba tasa.
- Ongeza matone sita ya alpha-naphthol (msuluhisho wa alkoholi 5%).
- Ongeza 40%ufumbuzi wa potasiamu caustic kwa kiasi cha 0.1 ml, au matone mawili.
- Kukoroga hufanywa kwa kutikisa bomba la majaribio taratibu.
- Tathmini matokeo baada ya dakika 15 tangu kuanza kwa jaribio.
Njia mbadala ya majaribio ni incubation ya usiku kucha, ambayo muda wake hupunguzwa hadi saa 18 au hadi siku moja. Mbali na njia hii, mtihani wa kuelezea pia hutumiwa: utamaduni huletwa kwa kitanzi ndani ya 2 ml ya kati, iliyoingizwa kwa muda wa saa nne, kisha vitendanishi huongezwa kwa kiasi sawa cha matone 2-3, vikichanganywa na mchanganyiko. matokeo yanatathminiwa baada ya dakika kumi.
Udhibiti ni mojawapo ya visababishi vya nimonia Klebsiella pneumoniae - chuja atcc 13883.
Tathmini ya matokeo
Baada ya muda unaohitajika baada ya kuongeza vitendanishi (kutoka dakika 5 hadi 15), rangi nyekundu ya cherry inapaswa kuzingatiwa na majibu mazuri, nyekundu na nyekundu - na majibu dhaifu ya chanya. Hakuna mabadiliko yaliyorekodiwa kama tokeo hasi.
Ziada ya potashi inayosababisha katika myeyusho inaweza kutoa mwigo wa athari chanya, kuchafua katika rangi ya shaba. Katika kesi hii, majibu mabaya ya koloni iliyojaribiwa inapaswa kurekodi. Pia, rangi ya shaba inaonekana katika hali ambapo tathmini inatolewa saa moja baada ya kuanzishwa kwa vitendanishi.
Wakati wa kutathmini matokeo, ni lazima izingatiwe kuwa kilimo cha muda mrefu cha microorganisms zilizojifunza (zaidi ya siku tatu) husababisha asidi ya kati, ambayo inaweza kusababisha matokeo yasiyo sahihi ya utafiti. Mwitikio unaweza kuwa chanya kidogo auhasi ya uwongo.
Mahitaji ya vitendanishi vya majaribio
Vitendanishi vya Voges-Proskauer lazima vikidhi mahitaji kama vile umakinifu sahihi, usafi wa hali ya juu na uthabiti, ambao hupatikana kupitia hifadhi ifaayo.
Vifaa vya kufanyia majaribio vilivyo tayari kutumia kwa kawaida huwa na vitendanishi kwa matumizi 100 au zaidi na vinapatikana katika bakuli za plastiki au glasi zenye rangi isiyo na rangi. Ubora unadhibitiwa na hati husika.
